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熱電色譜柱樣品制備與操作

更新時(shí)間:2019-03-22點(diǎn)擊次數(shù):1840
  熱電色譜柱為芳香和中等極性化合物的分析提供*的選擇性。苯環(huán)通過(guò)C4鏈連接到硅膠基質(zhì)上,可更好地與分析物分子上的芳香基團(tuán)接觸。熱電色譜柱包含C4連接基團(tuán),特別適合苯環(huán)和芳環(huán)分子的相互作用?;诟呒児枘z設(shè)計(jì),是設(shè)計(jì)用于解決現(xiàn)代色譜法諸多困難問(wèn)題的系列產(chǎn)品。熱電色譜柱對(duì)芳環(huán)分析物具有出眾的保留能力和*的選擇性。
  熱電色譜柱樣品制備與操作:
  1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動(dòng)相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強(qiáng)溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
  2、樣品溶液在進(jìn)樣前應(yīng)使用針頭式過(guò)濾器對(duì)樣品預(yù)先過(guò)濾。頻繁改變流動(dòng)相組成,會(huì)加速降低柱效。
  3、色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得較佳分離效果,使用時(shí)請(qǐng)不要超過(guò)200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會(huì)造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外較高操作溫度不要超過(guò)60℃。
  熱電色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需要注意下列問(wèn)題,以維護(hù)色譜柱。
 ?、俦苊鈮毫蜏囟鹊募眲∽兓叭魏螜C(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。
 ?、趹?yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?br />  ③一般說(shuō)來(lái)熱電色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
 ?、苓x擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
  ⑤避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
 ?、藿?jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
 ?、弑4嫔V柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿(mǎn)或,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
 ?、酂犭娚V柱使用過(guò)程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。
  熱電色譜柱是高度穩(wěn)定的強(qiáng)陰離子交換的硅膠為基質(zhì)材料的色譜填料,專(zhuān)門(mén)為使用含水和低pH值流動(dòng)相時(shí)設(shè)計(jì),適合分析小分子的有機(jī)酸。

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